盐析沉淀法的应用领域及实例
1. ?蛋白质的初步分离与纯化?
分级沉淀?:通过调节硫酸铵饱和度(如30%沉淀球蛋白,50%沉淀白蛋白),实现不同蛋白质的分步分离?。
案例?:从蛋清中分离卵清蛋白和球蛋白时,半饱和硫酸铵先沉淀球蛋白,饱和硫酸铵再沉淀卵清蛋白?。
优势?:操作温和,可保持蛋白质天然构象和生物活性?。
离子浓度仪

2. ?酶制剂的浓缩与纯化?
粗提液处理?:在酶粗提液中加入硫酸铵至40%饱和度,目标酶(如过氧化氢酶)沉淀,而杂蛋白仍溶解?。
后续纯化?:沉淀经离心收集后,可结合透析或层析法进一步纯化?。
3. ?工业规模生物制品生产? 离子浓度仪
重组蛋白纯化?:在发酵液中直接加入硫酸铵沉淀目标蛋白(如胰岛素),提高后续纯化效率?。
成本控制?:盐析法成本低,适合大规模处理?。
4. ?结合其他方法增强效果?
等电点联用?:先调节pH至目标蛋白的等电点,再盐析,可显著提高沉淀效率(如酪蛋白分离)?。
有机溶剂联用?:盐析后使用乙醇沉淀,可提高分辨率(如DNA与蛋白质共沉淀)?。
5. ?其他生物大分子分离?
核酸提取?:高盐浓度(如NaCl)可改变核酸溶解度,辅助DNA与蛋白质分离?。
多糖与脂类?:盐析法也可用于多糖或脂类物质的初步分离?
注意事项 离子浓度仪
盐浓度控制?:需精确计算饱和度(如硫酸铵溶解度随温度变化)?。
后续处理?:沉淀需透析或超滤脱盐,避免残留盐分影响蛋白功能?。
局限性?:产物纯度较低,需结合其他方法(如层析)进一步纯化?。